无菌室是微生物检测的重要场所与最基本的设施。它是微生物检测质量保证的重要物质基础。很多生物实验都需要无菌室。那么建立一个无菌室到底需要注意哪些事项呢？

实验前：

1 无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染，已污染者应停止使用。

2 无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 

3 需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。

4 工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 

5 无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。

6 供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用75％的酒精棉球消毒外表面。

实验时：

1每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。

2 吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。

3 接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 

4 带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 

5 如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。

6凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。